Abaxis Piccolo 芯片的检测流程

1 用户所需检测流程

对于用户而言，Abaxis Piccolo 仪器的检测流程非常简单，只需要如下图所示三个步骤即可，即加样-放入芯片-获取结果。通常，加样所需要的时间也只有 30 秒左右，在放入芯片后，机器获取结果的时间也非常快，只需要约 10-12 分钟，且在此时间内，操作人员完全可以不用理会检测，仪器会自动完成检测并给出结果。

图 3.1 对用户而言，只需要三步操作就可以获取检测结果。

值得一提的是，在加样阶段，该圆盘芯片只需要加入 100uL 样品，如全血，血浆会血清即可，不需要加入稀释液。

对用户而言，待检血样可以从指间或静脉中获取，在待检血样被置于芯片上样品入口时，血样会在芯片上的毛细作用力下进入芯片上的进样池中，芯片表面有两个箭头提示血样足量，故用户不需要提前对要加入的血样定量，只需保证样品量在 90uL 到 120uL 之间即可。如下图所示为芯片的基本结构和样品加入到双箭头处的状态。

2 仪器内部检测流程

1，稀释液释放：利用仪器的结构件将圆盘芯片中心部位预装稀释液释放出来。

2，稀释液定量，血样定量和分离：稀释液和血样分别进入各自的定量池进行定量，同时血样分离为血球和血浆。

3，稀释液和血浆混合：定量后的稀释液和血浆进入混合池发生混合。

4，稀释血浆分取到各检测池，冻干试剂球溶解：混合后的血浆通过分取通道进入各个检测池，在各检测池内部，冻干试剂球复溶。

5，发生反应并光学检测得出结果：测试仪器进行光学检测该各检测池中的生化反应并计算出检测结果。

具体的检测流程为：

图 3.3 加入血样后的圆盘芯片结构图。

内部稀释液被释放出来后，在离心作用下（5000rpm，逆时针，2.5min），样品和稀释液会按照不同的路径运转，其中稀释液进入到过渡池后再进入到稀释液定量池（体积 356.25uL），多余的稀释液会通过末端微通道进入到四个质控池中，再多余的稀释液进入废液池，这四个质控池即为 iQC 的一部分（详见第四部分：Abaxis Piccolo 圆盘芯片的质控机制）。

图 3.4 稀释液和血样定量过程图。

图 3.5 稀释液定量，血样定量和分离后的状态图。

在稀释液定量池的最远端和样品定量池的中间部位均有虹吸阀门，由于离心力远大于毛细力，第一轮离心时该虹吸阀门不会发挥作用，在离心停止时，虹吸阀门发挥作用并将定量后的全部稀释液（356.25uL）和定量后部分（18.75uL）血浆吸取到混合池中。

在混合时，仪器控制圆盘处于震荡状态，如旋转速度会突然降到 750rpm，然后缓慢提升到4000rpm，重复震荡 15 次促使血浆和稀释液发生充分混合，最低速度控制在 750rpm 是因为此时的离心力要大于混合池末端的虹吸阀门的毛细力。

在混合阶段完成后，旋转停止，此时液体会被毛细力吸引到混合池末端的虹吸阀门内，然后再进行离心分取操作（3000rpm，顺时针，40s），稀释后血浆会进入到 21 个检测池和一个废液池中。

每个检测池都只有一个微通道，用于液体进入和气体放出，在所有液体都进入到检测池和废液池后，仪器控制圆盘发生震荡（从 1000rpm，顺时针到 1000rpm，逆时针，70s），该震荡操作促使冻干试剂发生充分溶解。

图 3.7 稀释血浆被分取到各个检测池。

图 3.8 各检测池发生生化反应。

3 检测后结果解读

的质控机制。）